COURS
- La structure des enzymes : notion de site actif, de groupements fonctionnels et mécanismes réactionnels
- Notions de spécificité
- Classification des enzymes Enzyme Commission number (code EC)
- Bases de cinétique chimique. Notion d'ordre de réaction (0 et 1).
- Cinétique des réactions enzymatiques à 1 substrat. Détermination de la vitesse de réaction, notion de vitesse initiale; équations réactionnelles (dans l'hypothèse de l'équilbre rapide et dans l'hypothèse de l'état stationnaire) : représentations graphiques (Michaélis et Menten ; Lineweaver et Burk.... ), détermination de KM , VM , kcat et activité spécifique) ; influence de la température et du pH. Notion d'inhibitions simples réversibles (Compétitive, Non Compétitive, Incompétitive), effet de l'inhibiteur sur les paramètres cinétiques apparents. Définition et détermination de KI et de l'IC50.
- Analyses enzymatiques - dosages de métabolites : méthode cinétique et méthode en point final - dosages d'activités enzymatiques
- Purification d'enzymes
TRAVAUX DIRIGES
Exercices d’illustrations du cours : calculs de constantes, représentations graphiques, détermination des types d’inhibitions
Analyses de techniques et de résultats de dosages enzymatiques.
Purification d'enzymes: calculs des activités spécifiques, taux purification, rendements.
TRAVAUX PRATIQUES
- Etude de l'influence de la concentration de substrat et de la concentration d'enzyme et de la présence d’effecteur sur la vitesse de réaction: détermination par représentation graphique linéaire des paramètres cinétiques
Compétences :
A l’issue de cette UE l’étudiant aura acquis le vocabulaire spécifique à l’enzymologie, il aura perçu le rôle incontournable des enzymes dans tous les êtres vivants mais aussi dans les très nombreux procédés industriels. L’étudiant aura assimilé un mode d’études de ces molécules, applicable dans les UE des semestres suivants avec des situations et des modèles théoriques plus complexes.
Par les notions de classification et les techniques de dosage introduites dans cette UE de base, l’étudiant pourra dans les UE des semestres suivants de biochimie comprendre l’utilisation des enzymes dans un but préparatif ou analytique.
