Cette unité d’enseignement a pour but de regrouper et de développer un certain nombre de notions théoriques et pratiques complémentaires de celles dispensées dans les autres unités d’enseignement.
Principaux points développés :
COURS : -Techniques séparatives Fractionnement cellulaire. Préparation d’organites cellulaires et subcellulaires, application aux cellules procaryotes et eucaryotes. Caractérisation par différents enzymes marqueurs et définition d’un certain nombre de paramètres (activité enzymatique, activité spécifique, facteur de purification).
Techniques électrophorètiques, électrophorèse en milieu natif et dénaturant. Electrofocalisation préparative et analytique. Electrophorèse bidimensionnelle. Immunoélectrophorése. Electrophorèse en champ pulsé. Electrophorèse capillaire. Isotachophorèse.
Techniques chromatographiques : méthodes chromatographiques, adsorption, partage, affinité, échange d’ions, perméation sur gel, chromatographie supercritique. Principe de séparation et techniques mises en œuvre. Applications biochimiques, pharmaceutiques et agroalimentaires.
Radiomarquage : utilisation des radioéléments en biochimie, principaux isotopes utilisés, technique de comptage et de détection de la radioactivité. Il est également développé quelques notions de radioprotection.
Techniques immunochimiques (Elisa, RIA, western blot).
TRAVAUX DIRIGES : Exercices et problèmes portant sur l’ensemble des thèmes développés dans le cadre des cours magistraux.
TRAVAUX PRATIQUES : Purification et mise en évidence du lysozyme. Electrophorèse de protéines sur gel de polyacrylamide.
